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2006年春夏之交,一种无名高热病开始在南方部分省市猪场蔓延。来自农业部中国动物疫病预防控制中心的科研团队在短短1年多的时间里,克服重重困难,不仅成功找到病因,还研发出灭活疫苗,有效控制了疫情。
作为百姓餐桌上必不可少的肉类之一,猪肉的价格不仅关系着老百姓的生活质量,同时也是影响社会稳定与和谐的重要因素之一。从2006年春夏之交开始,一种无名“高热病”开始在南方部分省市猪场蔓延,一场没有硝烟的抗击猪病疫情的战役打响了。在这场战役里,来自农业部中国动物疫病预防控制中心(下称疫控中心)的科研团队在兽医诊断室常务副主任田克恭博士的带领下,冲在了最前线,在仅仅1年多的时间里,不仅确认高致病性猪蓝耳病病毒是猪“高热病”的原发病因,还研制出灭活疫苗,使疫情得到有效控制,打了一场漂亮的抗击战。
为使我国自主研发的重大科技成果及时抢占该领域的世界制高点,疫控中心已申请了两件中国发明专利——“猪繁殖与呼吸综合征疫苗、制备方法及应用”、“猪繁殖与呼吸综合征病毒超强变异株RT-PCR试剂盒”。“猪繁殖与呼吸综合征疫苗、制备方法及应用”还申请了PCT专利,目前已完成了国际初步检索和初步审查,正在等待国际公开。
首战告捷——快速找到原发病因
2006年春夏之交,一种以发病急、传播快、死亡率高为特征的猪“高热病”在我国南方部分地区爆发。由于病因不明,一时无法采取有效的防控措施,导致大批猪发病死亡。据报道,当年我国因高热病发病生猪达379.8万头,死亡99.2万头。
疫情发生后,国务院领导高度重视,温家宝总理、回良玉副总理多次批示要求对该病病因、疫源进行调查,要求科学防控,切实采取有效措施,防止疫情扩散蔓延。农业部领导紧急召开会议,周密部署,统筹安排,要求全力以赴快速查明病因。
疫情就是命令。疫控中心主任张仲秋立即组织动员、部署猪“高热病”的流行病学调查和病因确诊工作。自毕业后就在动物传染病领域从事研究工作的田克恭主动请缨,在疫控中心副主任徐百万的带领下,与遇秀玲博士等几名技术骨干一起,奔赴湖南、湖北等重疫区进行现场采样。确诊病因的第一步工作就是现场调查和采集样品。确诊一种未知的疫病,对样品的要求很严格,一是采集的样品要齐全;二是样品要新鲜。
下了飞机,他们就直接奔赴发病猪场。低矮的猪舍里温度高达40多度,热浪袭人,蚊虫肆虐。疫控中心的同志全然不顾这些,亲自深入猪舍查看疫情、解剖病猪、分析病情、采集样品。蚊虫将他们包围,跺跺脚依然认真解剖取样;汗水流成线,防护服一会就被浸湿,擦擦汗,继续投入工作。他们将采集到每一头病猪的每一个脏器组织分别装入保存袋,并立即放入保温箱中用冰袋压住以保持新鲜。不同的猪的病料也做好标记,分别存放。
他们忘我的工作精神、严谨的工作态度深深感动了在场的养殖户和基层陪同人员,大家开始主动为他们驱蚊、擦汗。
他们在湖北采集完样品后,又紧急赶往湖南,同时委派湖北的同志将样品迅速送到北京的实验室进行检测。
与此同时,根据以田克恭为首的科研团队制定的研究方案,实验室几个研究和检测平台齐头并进,对采集的样品从细菌、病毒、寄生虫的角度分别进行分离、培养、鉴定和检测,对阳性的检测结果大家一起综合分析。不论是白天还是夜晚,只要样品一到,实验室人员立即进行检测。
采样回来,田克恭就一头扎进实验室,与大家一起搞实验。整整20天,科研人员加班加点,夜以继日。每天晚上,大家聚集在会议室里,一边吃着盒饭,一边汇总当天的实验结果,你一言我一语地讨论和分析。
由于研究思路对头,采样准确,科研人员通过对大量的样品检测和试验数据的综合分析,一一排除了猪瘟病毒、猪圆环病毒、猪流感病毒、大肠杆菌以及寄生虫感染等,渐渐地聚焦在猪蓝耳病病毒上,并敏锐地察觉到导致这次猪“高热病”的蓝耳病病毒与传统的蓝耳病病毒相比在致病力上明显增强。通过对分离到的蓝耳病病毒进行基因序列分析,发现从采集的样品中分离到的蓝耳病病毒全部在Nsp2基因发生了30个氨基酸的缺失,这说明病毒确实发生了变异,而且这种变异国内外从未有过报道。
于是,他们得出初步结论:这个变异株可能是猪“高热病”的原发病因。同时,迅速建立起鉴别变异株和经典毒株的诊断方法。
著名动物病毒学家、中国农业科学院兰州兽医研究所原所长谢庆阁研究员一直非常观注他们的研发过程。他评价说,他们最大的贡献在于发现了这个变异株。一般来讲,筛查一个已知病毒,需要半个月的时间,未知病毒最快也得几个月,甚至好几年。在很多科研机构都在寻找病因之际,这支年轻的科研队伍之所以能在短短20天之内,就完成了从采样到得出初步结果,关键在于其严谨、求实、创新、肯吃苦的科研作风。
乘胜追击——动物回归实验顺利
2006年9月13日,农业部召开仅限特定人士参加的猪“高热病”病因内部研讨会。9月12日,田克恭和同事开始准备会上发言用的PPT。当最后一页PPT完成时,已经是早晨6点。他们踏着晨色,从单位直接赶往会场。
在研讨会上,田克恭首次在国内宣布了引发猪“高热病”的3个因素:变异的猪蓝耳病病毒是猪“高热病”的原发病因;多种病毒、细菌、寄生虫的混合感染、继发感染是造成高死亡率的主要原因;高温高湿的气候条件是造成猪发病率、死亡率较高的主要诱因。
为了进一步证明研究结果,田克恭又带领他的科研团队,进行了更深入的研究。从秋到冬,科研人员的足迹从南到北,在全国范围开展流行病学调查和病毒分离鉴定。截止到2006年年底,他们在全国19个发病省(市)分离到38株蓝耳病病毒变异株;随后选择分离来自江西、湖北、河北等省份的9株蓝耳病病毒进行全基因序列分析,并与美洲型蓝耳病病毒标准株(VR-2332株)比较,其Nsp2基因均在相同位置不连续缺失30个氨基酸,9株蓝耳病病毒全基因序列同源性为99.2%~99.5%。
很快,科研人员开始进行确定一个未知病毒必须完成的动物回归实验。也就是说,把培养到的病毒重新注入没有感染过任何蓝耳病病毒的健康易感猪体内,看其症状是否与临床发病时的表现一致。他们选择国内动物感染实验条件最好的内蒙古金宇保灵生物药品有限公司作为实验基地,分别选择21日龄、40日龄、60日龄、80日龄、6月龄等不同年龄的健康猪进行系统的动物回归实验。
那段时间里,田克恭和遇秀玲成了“空中飞人”,频繁往来于北京和呼和浩特之间,有时候早晨还在内蒙的实验基地,下午两三点可能已经坐在了北京的办公室里。
“我那时候是国航的金卡会员”,遇秀玲调侃着说。轻松的语气背后,是难以想象的奔波与劳累。
终于,动物回归实验证明了他们先前的研究结果。2007年3月,农业部正式将猪“高热病”定名为高致病性猪蓝耳病。
2007年6月,以田克恭为第一作者和通讯作者的研究团队,在美国公共科学图书馆出版的综合性自然科学期刊《PLOS ONE》上发表了有关中国猪“高热病”的研究论文,及时向全世界报道了在中国发生的猪“高热病”的最新研究成果。2008年4月在澳门举行的第二届亚洲猪蓝耳病高级研讨会上,他们的研究成果最终获得了世界动物卫生组织(OIE)等世界官方组织的认可。
捷报再传——灭活疫苗研制成功
疫情不等人。2007年6月高致病性猪蓝耳病高发季节马上就要到来,灭活疫苗的研制必须在此之前研发成功并投入使用。用半年不到的时间将疫苗研制成功,这是一个看似不可能完成的任务。但是,心系养殖户的疫控中心科研人员们下定决心:无论有多么大的困难,也要攻克这个难题!
来不及歇息,研究团队马上投入到高强度的灭活疫苗的研究工作之中。田克恭全面负责研究工作,提出研究思路、确定实验方案,同时又不放过每一个关键的试验环节。几个月下来,他的头发花白了许多,还累出了胃病……
终于,2007年春节前夕,连续奋战了几个月的科研人员将第一批研制好的灭活疫苗注射进实验猪的体内。大年初六,田克恭突然接到了中试车间打来的电话,被告知出现了新情况。他马不停蹄赶到了呼和浩特,迅速取样回北京实验室检测。检测结果证明,实验猪里混进了感染了经典蓝耳病病毒的阳性猪。
原来,金宇保灵生物药品有限公司是专门的疫苗生产企业,有对口专用实验养猪场。实验初期的几百头健康猪就是对口猪场提供的。但是,随着实验的进展,对口猪场已经无法满足实验的需要,科研人员不得不到其他猪场去筛选阴性猪。蓝耳病病毒隐性感染猪鱼目混珠,导致了实验的失败。
为了保证实验的准确性,科研人员立刻重新开始一个实验周期——消毒猪舍,重新培养病毒、制备灭活疫苗、选取实验猪、开始实验。
这样的困难不知经历了多少。终于,仅仅用了2个月的时间,科研人员攻克了病毒培养、工艺探索、疫苗保存等多个难题,取得了疫苗的安全性试验数据和效力检验实验数据。研究结果表明,疫苗单剂量、单剂量重复和超剂量接种仔猪后是安全的,仔猪注射疫苗后精神状态及食欲良好,注射部位及全身未见不良反应;疫苗的免疫攻毒保护率为80%。
农业部兽药评审中心启动了紧急防疫用兽用生物制品的快速评审程序,评审专家认为该制品安全有效、质量可控,可作为紧急防疫用品紧急生产和使用。
战果显著——疫情得到有效控制
2007年5月13日,农业部对外宣布,新型高致病性猪蓝耳病灭活疫苗通过农业部组织的专家审评,随后先后批准扬州优邦生物药品有限公司等19家兽用疫苗生产企业临时生产该灭活疫苗。
为了及早生产出合格的疫苗,田克恭主动与各生产厂家联系,耐心解答疫苗生产的技术问题。他牺牲了节假日奔赴各个厂家了解疫苗生产情况,提供相关技术支持,短短两个月时间跑遍了分布在全国各地的多个生产厂家。2007年6月13日,第一批新型高致病性猪蓝耳病灭活疫苗经检验合格,正式下线,标志着针对高致病性猪蓝耳病的专用新型疫苗正式投入使用。
据统计,2007年有10亿余毫升的灭活疫苗用于高致病性猪蓝耳病的紧急防疫,2008年上半年用量已达6亿毫升,为高致病性猪蓝耳病防控工作提供了强有力的技术支撑,有效控制了高致病性猪蓝耳病疫情。
与此同时,疫控中心紧锣密鼓地为研发成果申请专利保护。早在2007年年初,他们就找到了北京华进专利事务所,咨询相关专利申请事宜。具有丰富专利代理经验的事务所负责人吴鸿维、黄柯新在了解了相关情况后,敏锐地感觉到,这是一件对国家、对社会、对老百姓都意义重大的发明。他们立即放下了手头的事情,全身心投入到这项发明的专利代理之中,争分夺秒,希望在最短的时间内使我国自主研发的重大科技成果获得专利保护。
很快,2件中国发明专利申请和1件PCT专利申请被递交到了国家知识产权局。在猪繁殖与呼吸综合征方面的相关研究竞争十分激烈,各个国家都加紧在这个领域进行专利布局。黄柯新告诉记者,就在他们递交PCT专利申请后的1个星期,就检索到1条相关专利。目前,这2件中国发明专利申请初步审查合格,已经进入实质审查阶段。
田克恭深有感触地告诉记者,疫控中心早在成立之初就有很强的知识产权意识。通过打赢这场特殊的战斗,研发人员更加深切体会到了知识产权的重要性。现在,疫控中心承担的科研课题都首先考虑知识产权问题,还安排了专门的人员负责专利工作。除了这个项目,疫控中心还有两件中国发明专利申请正在办理中。
继成功研发灭活疫苗之后,科研团队又投入到研发免疫效果更好的活疫苗当中,而今已经取得初步成功并及时申请了专利。快速锁定病原、建立诊断方法、研制成功疫苗,只是高致病性猪蓝耳病防控的良好开端。现在,疫控中心科研人员又以更高的热情投入到了高致病性猪蓝耳病等重大动物疫病的防控工作之中,决心要彻底打赢这场抗击战。 |